各種致病菌對不同的抗菌藥物的敏感性不同，同一細菌的不同菌株對不同抗菌藥物的敏感性也有差異。為了能夠方便大家的工作所以慢慢的出現(xiàn)了藥敏試紙，下面我們就來說說藥敏試紙的試驗操作步驟及優(yōu)勢：

　　一、實驗操作步驟

　　1、藥敏片法：

　　用滅菌接種環(huán)取適量細菌分別在平皿邊緣相對四點涂菌，以每點開始劃線涂菌至平皿的1/2，然后找到第二點劃線至平皿的1/2，依次劃線，直至細菌均勻密布于平皿。（另：可將待試細菌于少量生理鹽水中制成細菌混懸液，將少量混懸液倒入平皿培養(yǎng)基上，輕晃平皿使鋪勻，放置5-10min）。

　　將鑷子于酒精燈火焰滅菌后略停，取藥敏片貼到平皿培養(yǎng)基表面。為了使藥敏試紙與培養(yǎng)基緊密相貼，可用鑷子輕按幾下藥敏片。為了使能準確的觀察結果，要求藥敏片能有規(guī)律的分布于平皿培養(yǎng)基上，一般可在平皿中央貼一片，外周可等距離貼若干片（外周一般可貼4-5片），每種藥敏片的名稱要記住。

　　將平皿培養(yǎng)基倒置放于37℃溫箱中培養(yǎng)24小時后，觀察效果。

　　2、結果觀察：

　　在涂有細菌的瓊脂平板上，抗菌藥物在瓊脂內向四周擴散，其濃度呈梯度遞減，因此在紙片周圍一定距離內的細菌生長受到抑制。過夜培養(yǎng)后形成一個抑菌圈，抑菌圈越大，說明該菌對此藥敏感性越大，反之越小，若無抑菌圈，則說明該菌對此藥具有耐藥性。

　　3、 影響藥敏結果的因素：

　?。?）培養(yǎng)基：應根據(jù)試驗菌的營養(yǎng)需要進行配制。傾注平板時，厚度合適（約5-6mm），不可太薄，一般90mm直徑的培養(yǎng)皿，傾注培養(yǎng)基18-20ml為宜。培養(yǎng)基內應盡量避免有抗菌藥物的拮抗物質，如鈣、鎂離子能減低氨基糖苷類的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和對氨苯甲酸（PABA）能拮抗磺胺藥和TMP的活性。

　?。?）藥物濃度：藥物的濃度和總量直接影響抑菌試驗的結果，需精確配制。

　?。?）培養(yǎng)時間：一般培養(yǎng)溫度和時間為37℃、12-24小時，有些抗菌藥擴散慢如多粘菌素，可將已放好抗菌藥的平板培養(yǎng)基，先置4℃冰箱內2-4小時，使抗菌藥預擴散，然后再放37℃溫箱中培養(yǎng)，可以推遲細菌的生長，而得到較大的抑菌圈。

　?。?）細菌接種量：細菌接種量應恒定，如太多，抑菌圈變小，能產(chǎn)酶的菌株更可破壞藥物的抗菌活性。

　　二、藥敏試紙的優(yōu)勢：

　　1、有益減少藥物殘留，有社會公益作用；

　　2、節(jié)省大幅度減少疫病損失和用藥損失，降低用藥成本，有明顯經(jīng)濟效益；

　　3、簡便采集病料接種后，使用不同藥物的藥敏試紙對致病菌進行敏感性測驗，以肉眼可觀察到的抑菌現(xiàn)象，做出致病菌對不同抗菌藥物的敏感性判斷，據(jù)此測定結果可提供一個快速合理的給藥方案；

　　4、可靠為養(yǎng)殖業(yè)中預防和治療細菌感染性疾病找到了一條可靠而科學的途徑；

　　5、及時防治及時，對癥下藥，提高療效，維護畜禽群體養(yǎng)殖健康。