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根據(jù)密度離心方法分離細胞

  離心技術(shù)是僅根據(jù)細胞的密度差和沉降速度差進行分離,細胞在液體介質(zhì)中的沉降速度取決于細胞的大小和密度,也受懸浮介質(zhì)的密度、黏度、滲透壓和力場大小所影響。


  根據(jù)細胞密度進行分離時,把細胞懸浮液鋪放在一連續(xù)或不連續(xù)密度梯度上,梯度的密度范圍應(yīng)該包括被分離細胞的密度。離心達到平衡后,每一類型的細胞都會在梯度中與之對應(yīng)的密度位置找到,與細胞大小無關(guān)。分離時只要離心機的離心力比速度沉降或離心淘洗所加的離心力大,一般都能獲得平衡。


  等密度離心可用于制備和分析目的。對于制備分離來說,即使單一類型的細胞株,也有一定密度的不均勻性,細胞混懸液中通常會出現(xiàn)不同類型細胞密度剖面的重疊,即使根據(jù)密度分離有一定的局限性,然而在一些情況下,改變細胞等滲環(huán)境,引起細胞膨脹或收縮可以改變細胞密度,有些細胞可以忍受高滲透壓而不喪失活性。等密度離心與其他技術(shù)聯(lián)合使用時,可以對細胞進行更加有效果的分離。


  把細胞加到梯度中有兩種方法,一種是把細胞懸浮液加到預(yù)形成的連續(xù)或不連續(xù)密度梯度的頂部;第二種方法是把細胞分散于整個梯度中。在第二種情況下,細胞一開始懸浮于整個密度梯度里,根據(jù)細胞在梯度中的位置,一些比周圍介質(zhì)密度小的細胞做向心移動,而比周圍介質(zhì)密度大的細胞作離心運動,而第一種狀況下細胞始終沉降。無論哪種加樣方法,都會在等密度位置找到細胞。

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