ELISA是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規(guī)模篩查試驗(yàn)又可以用于少量標(biāo)本的檢測(cè)，既可以做定性試驗(yàn)也可以做定量分析等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、腫瘤學(xué)和細(xì)胞因子等領(lǐng)域。ELISA試驗(yàn)廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。進(jìn)行ELISA試驗(yàn)就須用到試劑盒，在實(shí)驗(yàn)中操作過(guò)程是非常重要的，下面我們就來(lái)簡(jiǎn)單介紹一下ELISA試劑盒操作步驟：

　　1、取出試劑盒室溫平衡30min，取出血樣放至室溫；

　　2、配標(biāo)準(zhǔn)品：取150uL標(biāo)準(zhǔn)品加入150uL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液稀釋?zhuān)来蜗♂?次；

　　3、加樣：分別于各反應(yīng)孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50uL，樣品40UL，標(biāo)準(zhǔn)品做復(fù)孔，樣品做3孔；

　　4、分別于樣品孔中加入10UL抗體；

　　5、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品孔中分別加入50uL鏈酶親和素-HRP，蓋上封板膜,輕輕震蕩混勻，37℃溫育60min；

　　6、配洗滌液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用；

　　7、洗滌：小心揭開(kāi)封板膜，棄去液體，甩干，每孔加200uL洗滌液，靜置30s后棄去，如此重復(fù)5次，拍干；

　　8、顯色：每孔先加入顯色劑A 50uL，再加顯色劑B 50uL，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色6min；

　　9、終止：每孔加入終止液50uL，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立即轉(zhuǎn)為黃色）；

　　10、測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度。測(cè)定應(yīng)在加終止液10min之內(nèi)進(jìn)行；

　　11、保存結(jié)果，收拾桌面；

　　12、分析處理數(shù)據(jù)。

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